导读 大家好,小纵来为大家解答以上问题。引物是怎么发挥作用的,引物是怎么合成的这个很多人还不清楚,现在一起跟着小编来瞧瞧吧!
1、1 预先连
大家好,小纵来为大家解答以上问题。引物是怎么发挥作用的,引物是怎么合成的这个很多人还不清楚,现在一起跟着小编来瞧瞧吧!
1、 1.预先连接在固体载体上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应,脱去其5-羟基保护基DMT,得到游离的5-羟基。
2、 2.DNA合成的原料亚磷酰胺保护的核苷酸单体与活化剂四氮唑混合得到核苷亚磷酸酯活化中间体。它的3-末端被活化,5-羟基仍被DMT保护,并在溶液中与游离的5-羟基发生缩合反应。
3、 3.封闭反应。在缩合反应中,极少量的5个羟基可能不参与反应,用乙酸酐和甲基咪唑终止反应后,反应继续进行。这一小段可以根据实验需要通过后续环节的纯化方法进行分离。
4、 4.在氧化剂碘的作用下,磷酰基形式转化为更稳定的磷酸三酯。
5、 因此,可以合成引物。
关于引物是怎么发挥作用的,引物是怎么合成的的介绍到此结束,希望对大家有所帮助。
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